一、什么是流式荧光技术?
FISH,荧光原味杂交,应用荧光标记的DNA探针检测细胞中的特定基因是否表达、表达的量、是否异常、表达位置等信息,使用仪器是荧光显微镜;
融合基因,会提取检测细胞cDNA,应用已知融合基因引物kit,在RT-PCR仪检测进行扩增,如果存在融合基因,则可扩增出相应的产物,根据产物的荧光强度,还能检测出融合基因含量;
流式细胞术,使细胞形成单细胞悬液,应用荧光标记的抗体分子标记细胞,根据荧光分子表达情况检测细胞表面目的抗原。
关系:都应用荧光技术进行检测,
区别:检测的目的、方法、仪器均不同(顺带说一句,FISH和流式可以合作检测端粒酶,这种技术叫“FISH-Flow”因为是用流式仪检测的)
二、流式荧光免疫技术原理?
将荧光标记后的单细胞(或颗粒)悬液进入吸样管,进而随鞘液进入流动室。
进入流动室之前的管道变细,迫使鞘液从四周、样本在中心进入流动室,在外加压力的作用下由下向上(或由上向下)直线流动。
鞘液充满流动室将样品裹挟,当二者通过流动室喷嘴流出时,压力迫使鞘液包裹的液滴包含单一细胞或颗粒垂直通过检测区。
三、流式荧光技术怎么样?
紫色激光器荧光染料 405 nm 激发。适用于丰度较高的抗原。
绿色和黄绿色激光器的荧光染料 532 561 nm 激发。用于配有合适的滤光片通道的流式细胞仪光耐受强并且不依赖于PH值,是荧光显微镜技术的最佳选择
蓝光激光器荧光染料 488 nm 激发。适用于荧光显微镜技术。
红光激光器荧光染料 633 nm 激发。适用于配备氦氖激光器或红色二极管激光器的流式细胞仪。
四、流式荧光和化学发光的区别?
流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等,是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。美国Luminex公司是主要仪器厂商之一。
化学发光是物质在进行化学反应过程中伴随的一种光辐射现象,可以分为直接发光和间接发光。
五、什么是流式技术?
就是把连续的影像和声音信息经过压缩处理后放上网站服务器,让用户一边下载一边观看、收听,而不要等整个压缩文件下载到自己的计算机上才可以观看的网络传输技术。
该技术先在使用者端的计算机上创建一个缓冲区,在播放前预先下一段数据作为缓冲,在网路实际连线速度小于播放所耗的速度时,播放程序就会取用一小段缓冲区内的数据,这样可以避免播放的中断,也使得播放品质得以保证。
六、做流式实验荧光强度达到多少合适?
流式荧光技术最高的检测下限可达0.01 pg/ml,常规的酶联免疫吸附试验(ELISA)仅为μg级,比后者检测的灵敏度提高10—100倍。
七、流式细胞技术检测目的?
流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。
光源、液流通路、信号检测传输和数据的分析系统是流式细胞仪的主要组成。临床中运用流式细胞仪进行外周血白细胞、骨髓细胞以及肿瘤细胞等的检测是临床检测的重要组成部分。
八、荧光探针技术的原理?
荧光探针技术原理是利用化学共价键将识别基团和荧光基团连接起来的一类荧光探针,是比较常见的一类荧光探针。
该类探针通过对比加入分析物前后荧光强度的变化、光谱位置的移动或荧光寿命的改变等实现对分析物的检测。在该类荧光化学传感器的设计中。
九、sted荧光技术原理?
STED 受激辐射损耗显微术(Stimulated emission depletion microscopy)称为STED技术。成像原理:利用荧光饱和与激发态荧光受激损耗的非线性关系。核心思想:利用受激辐射选择性消耗激发光斑中边沿区域的激发态荧光分子从而减少有效荧光的发光范围。
十、荧光定量PCR技术?
实时检测PCR扩增,在扩增的指数期对起始模板进行定量,在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增强。我们实验室使用的BIOGHSC Super Probe Kit PCR实验检测DNA,测得的循环数在28左右,整个PCR过程有4个阶段,基线期---指数增长期---线性增长期---平台期,指数增长期内,PCR有高度重复性,一般的检测指标是看线性图谱的扩增曲线的起跳值(CT值)。